高职院校生物技术专业顶岗实习的实践与思考

顶岗实习是高职院校生物技术专业人才培养中一个重要的实践性环节。笔者对郑州牧业工程高等专科学校生物技术及应用专业进行顶岗实习的实践过程、所取得的成效及存在的问题等进行深入思考,提出了一些看法和认识。     

猪肺炎支原体膜蛋白P46基因在大肠杆菌中的表达

把猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)国际标准株232的P46基因克隆进pGEM-T-EASY载体上,通过PCR方法把该基因中三个编码Trp的密码子TGA突变为TGG,然后将该基因亚克隆到载体pMAL-P2X上,得到重组表达载体pMAL-P2X-P46.用该重组载体转化大肠杆菌TB1,得到表达重组菌TB1-pMAL-P2XA-P46,用终浓度为0.3 mM的IPTG在37℃下诱导表达,获得可溶性表达的融合蛋白MBP-P46,在免疫印迹试验中,兔抗MBP高免血清和兔抗猪肺炎支原体高免血清都能与目的蛋白发生阳性反应,证明猪肺炎支原体P46基因在大肠杆菌里获得了可溶性表达.该融合蛋白对于建立特异性和敏感性好的EIISSA方法具有重要意义.     

猪瘟病毒持续感染与猪瘟预防控制

研究证明,在自然条件下,猪瘟病毒持续感染通常是在免疫力较低的情况下,由于环境中的病毒反复感染产生的,由于感染猪还有一定的免疫力,病毒虽然可以在其体内局部存留,但还不足以引起猪发病.一般情况下,感染猪虽然持续带毒,但不表现临床症状,然而却可以不断向外排毒,再次感染其他猪,污染环境;带毒的种猪可以通过母猪的胎盘和公猪的精液传播给仔猪,造成仔猪的先天免疫耐受,导致疫苗免疫失败.实验还证明,即使在良好的免疫状况下,反复多次人工感染猪瘟强毒也可造成持续感染.由此可见,猪瘟病毒持续感染是一个复杂的问题.     

农艺措施对大豆籽粒蛋白质和脂肪含量的影响

探讨了栽培密度、撒可富专用肥、思德富多元长效肥等农艺措施对大豆籽粒蛋白质和脂肪含量的影响。结果表明 ,密度对蛋白质含量、脂肪含量和蛋白脂肪总含量的影响不大。在各种栽培密度中 ,品种九三 97- 6 0是在 30万株 /hm2 时籽粒的蛋白质含量、脂肪含量和蛋白脂肪总含量均达到最高值 ,而对于品种九三 96 - 12 7来说 ,是在 2 5万株 /hm2 时三者达到最高。并且 ,蛋白质含量、脂肪含量及蛋白脂肪总含量对栽培密度敏感程度因品种而异。撒可富专用肥和思德富多元长效肥均使蛋白质含量增加 ,使脂肪含量降低。施用撒可富专用肥后 ,蛋白脂肪总含量变化因处理而异。施用思德富后 ,蛋白脂肪总含量有所增加。     

冷季寒牧系列紫花苜蓿根系内电导率测定

采集青海大学农牧学院试验基地寒牧系列紫花苜蓿12个不同品系作材料,在青海大学试验基地内进行田间观测并结合实验室对其电导率进行了测定,以此为依据鉴定其抗寒性的强弱。试验结果表明,紫花苜蓿根系内电解质渗透率最大的是寒牧11号品系(78.8%),最小的是寒牧5号品系(51.8%);在所测的材料中抗寒性最强的是寒牧5号品系。     

鹌鹑源火鸡隐孢子虫在小白鼠和雏鸡体内内生发育阶段的超微结构比较

用鹌鹑源火鸡隐孢子虫（Cryptos poridium meleagridis）卵囊分别感染昆明系小白鼠和固始雏鸡，用透射电镜和扫描电镜观察比较了C．meleagridis在两种试验动物体内的内生发育虫体超微结构和致病性的差异。利用扫描电镜观察发现，鹌鹑源火鸡隐孢子虫（C.meleagridis）在小白鼠和雏鸡体内的寄生部位有较大差异，在小白鼠体内寄生于十二指肠，但在雏鸡体内主要寄生于回肠；C．meleagridis深嵌于小白鼠肠微绒毛丛内，微绒毛较为完整；但在雏鸡回肠，C．meleagridis似黏附在肠黏膜表面，微绒毛脱落明显，对雏鸡致病性明显比对小白鼠的致病性强。利用透射电镜在两种试验动物的样品中均观察到不同发育阶段的滋养体、裂殖体和大配子体以及正在孢子化的卵囊。滋养体和裂殖体在发育过程中可明显见到粗面内质网结构，裂殖生殖中期阶段粗面内质网尤其发达；小白鼠体内的C．meleagridis虫体与肠黏膜接触处形成一凹陷，寄生部位较深，而在雏鸡体内无此现象。此外，利用透射和扫描电镜均观察到虫体寄生部位周围微绒毛密度高而且也比其它部位长。形成这些差异的原因有待于进一步探讨。     

多系配套杂交群体遗传结构分析

利用8个微卫星标记对杜长大三元杂交群体5个种群，斯格配套系8个种群的遗传结构进行了分析。通过计算等位基因频率、基因杂合度、平均杂合度、多态信息含量、纯种间的遗传距离、F-统计量和迁移率进行分析。结果表明各群体的平均基因杂合度存在一定差异。纯种、祖代、父母代、商品代群体的平均座位杂合度和多态信息含量随着群体在杂交繁育体系中位置的由高到低而逐渐升高。Nei氏标准遗传距离显示，父本和母本间的遗传距离大，遗传距离大的父本和母本用于杂交，产生的杂种优势最大，这与实际的杂交组合一致。Fst衡量等位基因频率群体间方差，杜长大群体大约总变异的1．02％～15．60％来自种群间，而剩余的84．40％～98．98％来自种群内，斯格群体大约总变异的3．02％～15．22％来自种群间，而剩余的84．78％～96．98％来自种群内，斯格和杜长大纯种的遗传分化处于较小到中等之间。     

二花脸仔猪在运输过程中的行为特征和血浆皮质醇水平的变化

本试验采用实时跟踪摄像和颈静脉血管瘘连续采样,观察二花脸断奶仔猪在2h运输过程中的行为表现,并测定血浆皮质醇水平的动态变化。结果表明:运输前期(出发后15min)仔猪的探究行为和异常行为发生次数较多且持续时间较长,运输中期(出发后60~75min)此类行为显著减少(P<0.05),而到运输后期(最后15min)几乎观察不到此类行为;仔猪的躺卧行为在运输前期和中期发生次数较少,持续时间较短,而在运输后期仔猪大部分时间都处于躺卧状态(P<0.05);运输至中期仔猪大部分时间处于站立状态,而到运输后期站立行为显著减少(P<0.05);仔猪蹲坐行为发生的次数和持续时间在运输的前中后无显著差异(P>0.05)。仔猪上车后皮质醇水平迅速上升(P<0.05),出发15min升至峰值,且保持该高水平直到2h运输结束,下车后15min皮质醇水平迅速下降至上车前15min的基础水平。     

种植牧草改良盐碱化草地试验研究

针对近年来羊草草地利用不合理,载畜量过大,出现不同程度退化和盐碱化的问题。为改善草地植物生存条件,对退化、盐碱化草地进行了种草改良试验研究。结果表明,种植4种牧草后均改善了土壤养分状况,均增加土壤中的氮、磷和钾,其中敖汉苜蓿效果最佳,总氮和速效氮含量分别增加0.50%和31.91mg/kg,土壤中全磷和速效磷含量分别增加0.252%和11.33mg/kg,土壤中速效钾含量增加24.37mg/kg。含盐量和pH均有不同程度降低,最佳是碱茅,含盐量和pH分别下降0.058和0.9,其次为军需1号野大麦,含盐量和pH分别下降0.04和0.74。适应性强,抗旱、抗寒、耐盐碱,产量高、品质好。     

65%桑用毒死蜱乳油对家蚕的毒性试验

通过2007年春季65％桑用毒死蜱乳油的家蚕毒性饲养试验，发现在1000～4000倍使用浓度范围内，间隔3-5d家蚕表现急性中毒死亡；间隔6-8d家蚕中毒死亡率随浓度增高而增高，随浓度降低，家蚕中毒死亡龄次逐步延后，出现积累性中毒症状，同等有效剂量，桑用乳油的生活力和茧质指标明显好于一般乳油；间隔14～16d后，各处理的生活力和茧质指标与不喷药对照无显著差异存在。65％桑用乳油2000倍喷药，安全用叶间隔期春季推荐为15～20d；秋季为20～25d。